細菌種を グラム陽性菌とグラム陰性菌の 2 つのグループに区別するために使用される染色方法は、 グラム染色 と呼ばれます。グラム陽性菌とグラム陰性菌を区別する要因には、 細菌 の色、組成、細胞壁の化学的および物理的特性があります。
別の識別方法は、グラム陽性菌とグラム陰性菌のペプチドグリカンの量を検出することです。グラム陽性菌は青紫色、グラム陰性菌は赤色になります。
細菌が示す構造は、グラム陽性菌とグラム陰性菌を区別するために考慮できるもう 1 つの側面です。
グラム染色法は、臨床分析および微生物学研究室において最も重要な染色法の 1 つと考えられています。たとえば、臨床分析ラボでは、結果を得るためにこの技術が不可欠です。細菌は、膿や有機体液の塗抹標本中でグラム陽性またはグラム陰性として特徴づけられるため、検査専門家は感染症を監視できます。
臨床分析におけるグラム染色技術は、主に細菌の形態を事前に特定するため、または臨床サンプル中にかなりの数の細菌が存在するかどうかを確認するために使用されます。
グラム染色技術の結果で陽性反応が得られたにもかかわらず、結果ができるだけ物議を醸さないように、他の細菌同定方法を使用する必要があります。
一部の細菌は染色されないか、染色が弱いことを言及する価値があります。
![グラム陽性菌とグラム陰性菌。写真: Y_tambe / ウィキメディア・コモンズ (1、2) [CC-BY-SA 3.0]](wp-content/uploads/2010/02/GRAM.jpg)
グラム染色後のグラム陽性菌とグラム陰性菌。写真: Y_tambe / ウィキメディア・コモンズ ( 1 、 2 ) / CC-BY-SA 3.0
材料
顕微鏡スライド。浸漬油;カバーガラス。顕微鏡;プラチナストラップ。ブンゼンバーナー。滅菌水と染料: クリスタル バイオレットを含む溶液が入ったチューブ。
グラム陽性菌：ルゴール
- 黄色ブドウ球菌 – サフラニン
- ブドウ球菌 – アルコール 95%
グラム陰性菌：ガーゼ
- 大腸菌 – ピッセタ蒸留水
手順
- 乾燥塗抹標本を含むスライド上にメチル バイオレットを滴下し、15 秒間作用させます。
- メチルバイオレットの上の塗抹標本に水を加え、スライド全体を覆います。さらに 45 秒間そのままにしておきます。
- 時間が経過したら、染料を排出し、流水の細流で汚れを洗います。スライドをルゴールまたはグラムヨウ素で覆い、60 秒間放置します。
- ルゴールをすべて排出し、流水で洗います。
- 95% エチル アルコールまたはアセトンを塗布して、スライドを 10 ～ 20 秒間漂白します。
- 流水で洗います。
- スライド全体をサファリンで覆い、約 30 秒間染色します。
- 刃を少量の水で洗います。
- きれいな濾紙でスライドを乾燥させるか、自然乾燥させます。
- 液浸オイルを塗抹標本に一滴塗布し、液浸対物レンズ (100 倍) を備えた顕微鏡で観察します。
細菌を染色する技術は、実行された検査の 80% で正しい臨床診断を示し、技術の単純さと速度を考慮すると、その数値は非常に肯定的です。この技術は依然として低コストで簡単な設置が可能です。
珍品
グラム染色法は 1 世紀以上にわたって存在しています。 1884 年にハンス グラムによって開発されました。
参考文献:
http://www.provida.ind.br/site/index.php/bacterias/bacterias/122-tecnica-de-gram.htmlm
https://en.wikipedia.org/wiki/Gram_staining
http://www.biomedicinabrasil.com/2011/06/coloracao-de-gram.html
http://serc.carleton.edu/microbelife/research_methods/microscopy/gramstain.html
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