タンパク質の同定手順

タンパク質は、 アミノ酸 と呼ばれる基本単位 (モノマー) によって形成される高分子量の生物学的ポリマーです。タンパク質は細胞のあらゆる部分に存在するため、構造の観点から最も重要な化学成分です。化学反応の制御はタンパク質分子である 酵素 に依存するため、それらは生物の機能にとっても基本的なものです。したがって、すべての酵素はタンパク質の一例であると言えますが、すべてのタンパク質が酵素の一例であるわけではありません。

タンパク質の同定手順

以下の本文では、鶏卵白からタンパク質溶液として得られる特定のタンパク質の特性評価と同定のための実験室技術をいくつか紹介します。

タンパク質の同定手順

A – 一般的な特性:

  • 鶏卵を割り、白身と黄身に分け、白身に水50mLを加えて溶液を作り、黄身は捨てる。
  • 卵白溶液 10mL をビーカーに入れ、粗硫酸銅溶液を 3 滴加えます。
  • よくホモジナイズし、2.5mLの 水酸化ナトリウム 溶液を加えます。
  • 紫色が観察される。
タンパク質の同定手順

B – 特定の反応:

タンパク質の同定手順

1 – キサントプロテイン反応

  • 3 mL の卵白溶液と 1 mL の濃硝酸 3 試験管 に入れ、白い沈殿を形成します。
  • 約1分間注意深く加熱します。
  • チューブを流水で冷却します。
  • 1M 水酸化ナトリウム溶液をチューブにゆっくりと加えます。
  • チューブ内では黄色とオレンジ色の 2 色が観察されます。
タンパク質の同定手順

2 – ビウレット反応

  • 試験管に卵白溶液 3mL と 1M NaOH 1mL を入れ、よく振ります。
  • 試験管に硫酸銅溶液を数滴加えます。
  • 紫色が観察され、テストが陽性であることを示します。
タンパク質の同定手順

3 – スルフヒドリル基反応 (SH)

  • 試験管に卵白溶液 2mL と 1M NaOH 1mL を入れ、よく振ります。
  • 約2分間煮ます。
  • 酢酸鉛溶液を数滴試験管に加えました。
  • チューブ内に暗色が観察される。

以下に、タンパク質同定の基本的な手法をまとめた比較表に記載の手順を示します。

の識別

タンパク質

手順

結果

キサントタンパク質の反応
  • HNO3 を入れる
  • 準備し始める
  • NaOH (水溶液) をゆっくりと加えます
肯定的な結果:

黄色とオレンジの 2 相

ビウレット反応
  • NaOHを加える
  • 振る
  • CuSO 4(aq) を加え、振る
肯定的な結果:

紫またはライラック

スルフヒドリル基の反応
  • NaOHを加える
  • 準備し始める
  • 酢酸鉛を入れる
肯定的な結果:

暗色

参考文献:
ルフティ、マンスール。フェラドスとクロマドス:化学知識の社会的生産と私的流用、UNIJUI編、Ijuí/RS – 1992年。
ペルッツォ、フランシスコ・ミラガイア(チトー)。カント、エドゥアルド・レイテ。 Chemistry in the Everyday Approach、現代編、vol.1、サンパウロ/SP- 1998。

関連記事